Рестрикционные эндонуклеазы рестриктазы р ферменты

Рестрикционные эндонуклеазы, рестриктазы, р. ферменты * рэстрыкцыйныя эндануклеазы, рэстрыктазы, р. ферменты * restriction endonucleases or restriction enzymes — любой бактериальный фермент, узнающий определенные нуклеотидные последовательности (сайты узнавания, см.) в двунитчатой ДНК и катализирующий разрыв внутренних связей между специфическими нуклеотидами с образованием двунитчатых разрывов с липкими или тупыми концами. Р. э., действующие на одинаковые последовательности нуклеотидов, называются изошизомерами (см.), активность которых часто зависит от метилирования нуклеотидов в сайте рестрикции (см.). Название рестриктазы образуется из начальных букв названия вида бактерии (напр., Escherichia coli — Eco, Bacillus amyloliquefacience — Bam) и названия штамма или типа функции (EcoR, BamH). Если какой-то хозяйский штамм имеет несколько рестрикционных ферментов, то они обозначаются римскими цифрами (EcoR I, EcoR V, Hind II), отражающими хронологию их открытия. Сайт узнавания и место разрезания обозначаются следующим образом (для EcoR I):

↓

1 5 ? GAA TTC ? 3 1

1 3 ? CTT A AG ? 5

↑

Р. э. можно разбить на 3 класса. Р. э. 1-го класса включают 3 субъединицы (R — рестрикция; M — метилирование, S — последовательность узнавания). Они проявляют функции модификации и рестрикции, место разрезания здесь не является специфичным; ферменты этого класса не используются в технологии рекомбинантной ДНК.

Р. э. 2-го класса узнают и разрывают двунитчатую ДНК в пределах определенной последовательности, состоящей из 4, 5, 6, 7 или 8 нуклеотидов. Этот класс, в свою очередь, подразделяется на несколько подклассов. Р. э. 3-го класса состоят из двух субъединиц, узнающих короткие несимметричные последовательности, связывающихся с ними и катализирующих вырезание 24-25 п. о. Применение Р. э. резко повысило эффективность анализа структуры ДНК в геномах разных организмов и дало возможность проводить работы по генной инженерии. За открытие Р. э. и их применение в молекулярной генетике В. Арбер, Х. Смит и Д. Натанс в 1978 г. удостоены Нобелевской премии.